Упрощенная HTML-версия
272
Природа ретровирусов уникальна тем, что однажды попав в восприимчи-
вую клетку, они становятся частью организма навсегда. При этом изменяются
свойства инфицированной клетки. [1, 2, 3]
Метод атомно-силовой микроскопии (АСМ) широко используют для изу-
чения мембран и подмембранных клеточных структур, как в норме, так и при
патологии. [9, 10]
При изучении методом АСМ лимфоцитов животных, зараженных вирусом
лейкемии, в характеристиках таких лимфоцитов были установлены достоверные
различия по сравнению с не инфицированными лимфоцитами. [1, 2, 3]
Целью нашего исследования явилась оценка морфологических и биофизи-
ческих параметров лимфоцитов кошек при
FIV
и
FeLV
-инфекции.
В связи с поставленной целью, нами были определены следующие задачи:
- изучить лимфоциты кошек при
FIV
,
FeLV
и
FIV-FeLV
-инфекции методом
АСМ;
- сравнить полученные данные с характеристиками лимфоцитов здоровых
кошек.
Материалом для исследования послужили лимфоциты периферической
крови кошек, инфицированных ретровирусами, как в моноинфекции, так и в
форме коинфекции. А также лимфоциты, полученные от интактных животных.
Для АСМ-сканирования, лимфоциты выделяли из периферической крови
в градиенте плотности фиколл-урографина (плотность 1,077 г/мл) по стандарт-
ной методике. Адгезию осуществляли при 37°С 60 минут. Фиксировали адгези-
рованные лимфоциты безводным метиловым спиртом 5 минут. Для исследова-
ния поверхности клеток использовали сканирующий зондовый микроскоп Solver
P47-PRO (НИТИ УлГУ, лаборатория сканирующей и зондовой микроскопии).
Сканирование поверхности фиксированных препаратов проводили в полукон-
тактном режиме на воздухе. Использовались неконтактные кремниевые зонды
серии NSG10 (NT-MDT) с жесткостью 5,5-22,5 Н/м, резонансной частотой 150
кГц, радиусом закругления 10 нм, высота зонда 10-20 мкм. Все полученные изоб-
ражения сканированных поверхностей клеточных мембран обрабатывали в про-
грамме Nova 1.0.26.1443.
В результате АСМ-сканирования были получены морфометрические и
биофизические данные, характеризующие лимфоциты периферической крови
кошек. АСМ-изображение лимфоцитов крови кошек при
FeLV
-инфекции приве-
дено на рисунке 1.